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關(guān)于PCR檢測(cè)儀的PCR反應(yīng)三大主要步驟分析

           PCR檢測(cè)儀是利用升溫使DNA變性,用控制性內(nèi)切酶使DNA雙鏈解鏈,在聚合酶的作用下使單鏈變成雙鏈,進(jìn)而起到基因復(fù)制的目的。PCR的反應(yīng)包括三個(gè)主要步驟;
         分別是Denaturation ,Annealing of primers,Extension of primers。 所謂 Denaturing乃是將DNA加熱(至90~95℃)變性, 將雙股的DNA加熱后轉(zhuǎn)為單股DNA以做為復(fù)制的模板。 而Annealing 則是令 Primers于一些的溫度下(冷卻至55~60℃)附著于模板DNA兩端。 后在DNA聚合酶e.g.Taq-polymerase 的作用下(加熱至70~75℃)進(jìn)行引物的延長(zhǎng) Extension of primers及另一股的合成。
           PCR的早設(shè)想核酸研究已有100多年的歷史,本世紀(jì)60年代末、70年代初人們致力于研究基因的體外分離技能,Korana于1971年早提出核酸體外擴(kuò)增的設(shè)想:“經(jīng)過(guò)DNA變性,與合適的引物雜交,用DNA聚合酶延伸引物,并不斷重復(fù)該過(guò)程便可克隆tRNA基因”。
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